发布时间：2023-11-06 07:01:18 文章作者：知网小编 www.bear18.com
胰蛋白酶活性测定的方法与步骤. 在动物胰脏中，胰蛋白酶是以无活性的酶原状态存在的。. 在生理条件下，胰蛋白酶原随胰液分泌至十二指肠后，在小肠上腔有Ca2 的环境中，为肠 激酶 或胰蛋白酶所激活，其肽链N-端的赖氨酸与异亮氨酸之间的一个肽键被水解，失去一个酸性6肽，其 分子 构象发生一定的改变后转变为具有催化 蛋白质 水解活性的胰蛋白酶。. 胰蛋白酶原 分子 量约为24000，其等电点为pH8.9;胰蛋白酶的分子量约为23400，其等电点为pH10.8。. 胰蛋白酶在pH3.0时最稳定，其浓溶液可贮存于冰箱 (0℃以下)数周而活性无显著丧失。. pH<3时，胰蛋白酶易变性。. PH>5时，胰蛋白酶易自溶。.
以酪蛋白为底物，主要用于测定胰蛋白酶粗制品的活力。 胰蛋白酶催化水解底物酪蛋白生成不被三氯醋酸沉淀的 小分子 肽以及氨基酸。 在一定浓度范围内，酶的水解滤液在波长275nm处光吸收的增值与胰蛋白酶的活力单位成正比。
经溶 解后，以极少量活性胰蛋白酶激活，使其酶原转变为有活性 的胰蛋白酶（糜蛋白酶和弹性蛋白酶同时也被激活），被激 活的酶溶液再以盐析分级的方法除去糜蛋白酶及弹性蛋白 酶等组分。 收集含胰蛋白酶的级分，并用结晶法进一步分离 纯化。
胰蛋白酶原的分子量约为24000，其等电点约为pH8.9，胰蛋白酶的分子量与其酶原接近（23300），其等电点约为 10 pH10.8，最适pH7.6～8.0，在pH=3 时最稳定，低于此pH 胰蛋白酶易变性，在pH>5 时易自溶。 Ca 2+离子对胰蛋白 酶有稳定作用。
